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標記免疫分析技術的種類,有何區別
點擊次數:796 更新時間:2022-04-20

 免疫標記分析技術主要包括:放射物標記、酶標記、發光標記、熒光標記和金標記方法。

1 放射物標記分析:

用放射物標記抗原或抗體發展的放射免疫分析(radio immunoassay, RIA)是美國科學Yalow

和Berson于1959年創立的一種微量分析法,它是將具有高靈敏度的放射性核素示蹤技術和特異性免疫化學技術相結合而建立的新方法。該技術利用核素標記物的放大效應,改善了待測物的檢測下限,同時以抗體或抗原作為結合試劑,大大提高了檢測方法的特異性。

2 熒光標記分析:

以熒光標記的熒光免疫分析(fluorescein immunoassay, FIA)是由Conn等首/創于20世紀40年代的一種標記免疫學技術,其所用標記物是熒光素和熒光染料,是將抗原或抗體標記以熒光物質與相應抗原或抗體結合,在熒光顯微鏡或紫外線照射下,檢測熒光強度和熒光現象的一種檢測方法。熒光標記免疫法靈敏度高,但熒光素常會產生生物學毒性,導致抗體或抗原的靈敏度和選擇性下降

3.酶標記分析技術:

是繼免疫熒光抗體技術和放射免疫分析之后發展起來的一大新型的血清學技術。1966年,Nakane等和Avrameas等分別報道用酶代替熒光素標記抗體,建立了酶標抗體技術(enzyme-labelled antibody technique),用于生物組織中抗原的定位和鑒定。1971年,Engvall Van Weemen等報道了酶聯免疫吸附試驗,從而建立了酶標抗體的定量檢測技術。20世紀80年代,基于酶標記抗體檢測和鑒定蛋白質分子的免疫轉印技術問世。目前,免疫酶標記技術已成為免疫診斷、檢測和分子生物學研究中應用*泛的免疫學方法之一。

4.發光標記分析

20世紀80年代末,國外開始用化學發光試劑來標記抗原或抗體,從而建立了發光免疫分析技術。狹義的發光免疫分析( luminescence immunoassay,LIA )主要是指化學發光免疫分析(chemiluminescence immunoassay, CLIA)。另外,還有酶放大化學發光免疫分析和電化學發光免疫分析( electrochemiluminescence immunoassay , ECLIA)。CLIA是Sohrocler和Halman在20世紀70年代末期建立的,該方法兼有發光分析的高靈敏度和免疫反應的特異性。其基本原理同酶標記分析法,是用化學發光反應的試劑(可以是發光劑或催化劑等)標記抗原或抗體,

標記后的抗原和抗體與待測物經過一系列的免疫反應和理化步驟(如離心分離、洗滌等),最后以測定發光強度形式測定。

5 超順磁微粒標記分析

以磁性粒子標記的磁性免疫分析技術(Magnetic Immuno Chromatofraphic Tes,tMICT)是現代物理學與生物技術結合研發生產的磁性分析檢測技術,最早應用于基礎醫學領域[13,14]。與其它標記技術不同,該技術一個顯著的優點就是用磁性粒子標記不受有色雜質干擾,可用于直接測量血液、食品、污水等有色樣品。其原理是利用超順磁性納米微粒作為標記物,由高靈敏度磁性檢測儀器測定結合在免疫復合物上的磁性微粒所產生的局部磁場效應,從而得出所測分析物的定量結果。

 

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