一、薄層色譜概念
 

　　最chang用的薄層色譜也屬于液-固吸附色譜。同柱色譜不同的是吸附劑被涂布在玻璃板上，形成薄薄的平面涂層。干燥后在涂層的一端點樣，豎直放入一個盛有少量展開劑的的有蓋容器中。展開劑接觸到吸附劑涂層，借毛細作用向上移動。與柱色譜過程相同，經過在吸附劑和展開劑之間的多次吸附-溶解作用，將混合物中各組分分離成孤立的樣點，實現混合物的分離。
 

　　除了固定相的形狀和展開劑的移動方向不同以外，薄層色譜和柱色譜在分離原理上基本相同。由于薄層色譜操作簡單，試樣和展開劑用量少，展開速度快，所以經常被用于探索柱色譜分離條件和監測柱色譜過程。
 

　　二、薄層色譜條件
 

　　⑴固定相選擇
 

　　柱色譜中提到的吸附劑都可以用作為薄層色譜的固定相，分離性能及使用選擇同柱色譜的選擇原則相同一般用于薄層色譜時，要求吸附劑的粒度更小。商品吸附劑區分為色譜級(用于柱色譜)和薄層色譜級(用于薄層色譜)。
 

　　⑵展開劑選擇
 

　　薄層色譜展開劑的選擇和柱色譜一樣，主要根據樣品中各組分的極性、溶劑對于樣品中各組分溶解度等因素來考慮。展開劑的極性越大，對化合物的洗脫力也越大選擇展開劑時，除參照表列溶劑極性來選擇外，更多地采用試驗的方法，在一塊薄層板上進行試驗：
 

　　①若所選展開劑使混合物中所有的組分點都移到了溶劑前沿，此溶劑的極性過強；
 

　　②若所選展開劑幾乎不能使混合物中的組分點移動，留在了原點上，此溶劑的極性過弱。
 

　　當一種溶劑不能很好地展開各組分時，常選擇用混合溶劑作為展開劑。先用一種極性較小的溶劑為基礎溶劑展開混合物，若展開不好，用極性較大的溶劑與前一溶劑混合，調整極性，再次試驗，直到選出合適的展開劑組合。合適的混合展開劑常需多次仔細選擇才能確定。
 

　　⑶相對移動值從點樣原點開始到展開后的溶劑前沿，是溶劑的移動距離，記為lo，混合物中各組分的移動距離分別記為l1，l2，l3…。
 

　　⑷顯色
 

　　分離的化合物若有顏色，很容易識別出來各個樣點。但多數情況下化合物沒有顏色，要識別樣點，必須使樣點顯色。通用的顯色方法有碘蒸氣顯色和紫外線顯色。
 

　　①碘蒸氣顯色：將展開的薄層板揮發干展開劑后，放在盛有碘晶體的封閉容器中，升華產生的碘蒸氣能與有機物分子形成有色的締合物，完成顯色。
 

　　②紫外線顯色：用摻有熒光劑的固定相材料(如硅膠F，氧化鋁F等)制板，展開后在用紫外線照射展開的干燥薄層板，板上的有機物會吸收紫外線，在板上出現相應的色點，可以被觀察到。
 

　　有時對于特殊有機物使用專用的顯色劑顯色。此時常用盛有顯色劑溶液的噴霧器噴板顯色。
 

　　三、薄層色譜操作(見視頻“色譜裝置與操作”)
 

　　⑴制板(以硅膠板為例)
 

　　選擇合適的玻璃板(經常使用顯微鏡上的載玻片)，依次用水和乙醇洗凈，晾干。取適量薄層色譜用的硅膠，加適量蒸餾水調成糊。調制時慢慢攪拌，勿使產生氣泡。將糊倒在玻璃板上，搖動攤平，晾干。使用前放入烘箱內，在105-115oC左右烘干40-50分鐘。冷卻后使用。
 

　　⑵點樣
 

　　將試樣用最少量展開劑溶解，用毛細管蘸取試樣溶液，在薄層板上點樣。在樣點上輕輕畫出一條平行于玻璃板底邊的細線。薄層色譜板載樣量有限，勿使點樣量過多。
 

　　⑶展開
 

　　吹干樣點，豎直放入盛有展開劑的有蓋展開瓶中。展開劑要接觸到吸附劑下沿，但切勿接觸到樣點。蓋上蓋子，展開。待展開劑上行到一定高度(由試驗確定適當的展開高度)，取出薄層板，再畫出展開劑的前沿線。
 

　　⑷顯色，計算Rf值
 

　　揮發干展開劑，選擇合適的顯色方法顯色。量出展開劑和各組分的移動距離，計算各組分的相對移動值。
 

　　四、薄層色譜應用
 

　　⑴可用于判斷兩個化合物是否相同(同一展開條件下是否有相同的移動值)；
 

　　⑵可用于確定混合物中含有的組分數；
 

　　⑶可用于為柱色譜選擇合適的展開劑，監視柱色譜分離狀況和效果；
 

　　⑷可用于檢測反應過程。